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ANALISIS GENETICOS EN LEVADURAS Ventajas de levaduras como organismo genético modelo: Organismo eucarionte (sistema genético y celular similar otros eucariontes.

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1 ANALISIS GENETICOS EN LEVADURAS Ventajas de levaduras como organismo genético modelo: Organismo eucarionte (sistema genético y celular similar otros eucariontes complejos) Unicelular (ventajas de manipulación) Crecen fácilmente y con bajo costo. Existen en forma diploide (dominancia, estudiar las interacciones entre los alelos ) y haploide (único alelo de cada locus, alelos recesivos ). Después de la meiosis, todos los productos de una división meiotica están presentes en una única estructura (asco). La tétrada son las 4 células producidas por una única división meiotica. Permite observar los efectos de las divisiones meioticas individuales e identificar fácilmente los eventos de entrecruzamiento.

2 Ciclo de Vida Saccharomyces cerevisiae

3 3 ESPORA Célula reproductora generalmente haploide y unicelular. La espora produce un nuevo organismo al dividirse por mitosis sin fusión con otra célula.mitosis La reproducción por esporas permite al mismo tiempo la dispersión y la supervivencia (estructura de resistencia) por largo tiempo en condiciones adversas. La espora es un elemento importante en los ciclos vitales biológicos de plantas, hongos y algas. Las esporas se pueden clasificar según su función, estructura, origen del ciclo vital o por su movilidad.ciclo vital

4 Meiosis y esporulación son inhibidos en altos niveles de C y N.

5 ANALISIS GENETICOS EN LEVADURAS Complementación Genetica MATα Yfg+: revela que la mutacion es recesiva. MATα yfg1: fenotipo yfg- revela que mutacion esta presente en MATa Yfg-. Clonado Análisis de Tetradas

6 Análisis de tétrada Análisis de tétrada se puede utilizar para confirmar si un fenotipo es causada por una mutación específica, la construcción de cepas, y para la investigación de la interacción gen.

7 Ditype Parental Un tipo tétrada que contiene dos genotipos diferentes, ambos de los cuales son los padres. Dos ascosporas de tipo no recombinante. Ditype no parental Un tipo tétrada que contiene dos genotipos diferentes, ambos de los cuales son recombinante. (doble entrecruzamiento si A y B estan en el mismo cromosoma.) Tetratype Un tetratype es un cuarteto con cuatro genotipos diferentes, dos padres y dos recombinante. Consiste de dos esporas recombinantes dos parentales y nos indica un solo cruce entre dos loci ligados. Parentales AB x ab

8 Proporción PD:NPD:T = 1:1:4 Existen desviaciones a esta proporcion en el caso de que A y B se encuentren ligados. (PD> NPD). Los genes del array están ligados a ssk2 y a ubp3???

9 En la germinación, que estamos seleccionando? Buscamos una espora del tipo: Cual es la frecuencia de que esto ocurra? MATa xxxΔ::kanR yyyΔ::natR can1::Pste2-Sp_his5 lyp1Δ Histidina – Canavanina Thialysina G418 NAT Medio de Seleccion Doble Mutante : 1/2 n n=5, entonces 1/32.

10 Para recordar:


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