Técnicas de sedimentación de ácido nucleico

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Transcripción de la presentación:

Técnicas de sedimentación de ácido nucleico Técnicas de sedimentación de ácido nucleico. (a) Separación de moléculas de DNA de diferente tamaño por la velocidad de sedimentación. El gradiente de densidad de la sacarosa se establece dentro del tubo (paso 1) al permitir que una solución de sacarosa de concentración cada vez mayor drene por la pared del tubo. Una vez que el gradiente se forma, la muestra se coloca con cuidado en la parte alta del gradiente (pasos 2 y 3), y el tubo se somete a centrifugación (p. ej., 50 000 rpm durante 5 h) como se ilustra en el paso 4. Las moléculas de DNA se separan con base en su tamaño (paso 5). (b) Separación de las moléculas de DNA por sedimentación de equilibrio con base en las diferencias en la composición. La muestra de DNA se mezcla con la solución de CsCl (paso 1) y se somete a centrifugación prolongada (p. ej., 50 000 rpm durante 72 h). El gradiente de CsCl se forma durante la centrifugación (paso 2) y las moléculas de DNA forman bandas en regiones de densidad equivalente (paso 3). (c) El tubo del experimento b se punciona y se permite que el contenido gotee a tubos sucesivos, lo que fracciona el contenido del tubo. Se mide la absorbancia de la solución en cada fracción y se grafica como se muestra. De: Técnicas en biología celular y molecular, Biología celular y molecular. Conceptos y experimentos, 7e Citación: Karp G. Biología celular y molecular. Conceptos y experimentos, 7e; 2017 En: https://accessmedicina.mhmedical.com/DownloadImage.aspx?image=/data/books/2036/karp_c18_fig-18-035.png&sec=153039053&BookID=2036&ChapterSecID=153038861&imagename= Recuperado: November 03, 2017 Copyright © 2017 McGraw-Hill Education. All rights reserved