Los gráficos de Scatchard se basan en diálisis de equilibrio repetidas con una concentración constante de anticuerpo y concentración variable de ligando.

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Transcripción de la presentación:

Los gráficos de Scatchard se basan en diálisis de equilibrio repetidas con una concentración constante de anticuerpo y concentración variable de ligando. En estos gráficos, r es igual a las molas de ligando unido/mola de anticuerpo, y c es la concentración de ligando libre. A partir de un gráfico de Scatchard, pueden obtenerse tanto la constante de equilibrio (Ka) como el número de sitios de unión por cada molécula de anticuerpo (n), o su valencia. a) Si todos los anticuerpos tienen la misma afinidad, un gráfico de Scatchard proporciona una línea recta con una pendiente de –Ka. La intersección x es n, la valencia del anticuerpo, que es 2 para la IgG y otras Ig divalentes. Para la IgM, que es pentamérica, n = 10 y para la IgA dimérica, n = 4. En este gráfico, el anticuerpo #1 tiene una afinidad más alta que el anticuerpo #2. b) Si la preparación de anticuerpo es policlonal y tiene un rango de afinidades, un gráfico de Scatchard da una línea curva cuya pendiente está cambiando constantemente. La constante de afinidad K0 promedio puede calcularse al determinar el valor de Ka cuando la mitad de los sitios de unión están ocupados (es decir, cuando r = 1 en este ejemplo). En este gráfico, el antisuero #3 tiene afinidad más alta (K0 = 2.4 × 108) que el antisuero #4 (K0 = 1.25 × 108). Note que las curvas mostradas en a) y b) son para anticuerpos divalentes, como la IgG. De: Sistemas y métodos experimentales, KUBY. Inmunología, 7e Citación: Owen JA, Punt J, Stranford SA, Jones PP. KUBY. Inmunología, 7e; 2016 En: http://accessmedicina.mhmedical.com/DownloadImage.aspx?image=/data/books/1953/owen_c20_fig-20-012.png&sec=145988442&BookID=1953&ChapterSecID=143398556&imagename= Recuperado: October 11, 2017 Copyright © 2017 McGraw-Hill Education. All rights reserved