Transcripción y replicación del ADN mitocondrial
Características del mtDNA DNA circular Dos cadenas diferentes L y H Las dos cadenas se pueden separar en gradientes de densidad de alto pH
Molécula circular (16569 bp en humanos) Molécula circular (16569 bp en humanos). Secuencia completa: Anderson, et al 1980./ Secuencia de Cambridge Cadenas complementarias asimétricas H – rica en bases G y L – rica en bases C Carece de intrones, los genes se ubican uno a continuación del otro. Sólo dos regiones de secuencias no codificantes: -Entre los extremos de los genes tRNAlisina y ATPasa8 (5´8294-3´8301) (9bp) -D-Loop (Asa D o RHVI) 16024-576 (1121bp)
Genoma Mitocondrial
D-loop
La replicación del mtDNA de mamíferos ocurre mediante un mecanismo de desplazamiento asincrónico que involucra dos orígenes unidireccionales ubicados en distintas cadenas.
Factor de transcripción mitocondrial A mtTFA Se une a una secuencia promotora en el DNA y lo desenrolla promoviendo la transcripción Factor de transcripción mitocondrial A
Codificada en el núcleo mt RNA POL Codificada en el núcleo Homóloga a las RNA Polimerasas de los bacteriofagos T7, T3 y SP6
Transcripción pre-replicativa CSB: conserved Sequence blocks Estructura Cloverleaf potencial cerca de CSB I
Formación del primer Una vez formado el transcripto, la Rnasa MRP (endorribonucleasa sitio-específica) lo procesa, formando un OH 3`libre para que el primer pueda ser elongado por la DNA polimerasa y tenga lugar la replicación.
Probable reconocimiento de primers DNA polimerasa gamma g Probable reconocimiento de primers de tipo tRNA Subunidad catalítica DNA polimerasa Exonucleasa 3`- 5`
Replicación
Regulación del número de copias La activación del factor de transcripción nuclear NRF-1 resulta en la estimulación de la biogenesis mitocondrial ya que NRF-1 activa al gen del mtTFA. La pérdida de mtTFA resulta en la pérdida del mtDNA y de la función mitocondrial.