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Metabolismo y nutrición
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EUCARIOTAS QUIMIOHETERÓTROFOS
C como nutriente principal - Degradadores de materia orgánica CONDICIONES AMBIENTALES PARA CRECIMIENTO TEMPERATURA MESÓFILOS (10-35 C) Mayoría (T óptima C) Condiciones industria y laboratorio Complejidad celular eucariotas limita T hasta C pH pH óptimo Mayoría: pH 4-8.5 pH x intercambio iones necesitan buffers (KH2PO4 - K2HPO4 ) Bacterias pH neutro - OH- (7-8) pH Hongos ∆ pH alrededores (iones, enzimas) microambientes raíces, estomas
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CONDICIONES AMBIENTALES PARA CRECIMIENTO
O2 Aerobios facultativos Crecen con o sin O2 Fermentación azúcares respiración anaeróbica DISPONIBILIDAD DE H2O Todos los Hongos necesitan H2O ingreso nutrientes enz. extracelulares medio reacciones citosol Crecimiento hifal (citoesqueleto) Turgencia p/penetrar sustratos sólidos Hongos con tolerancia a stress hídrico, daño alimentos almacenados
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CONDICIONES AMBIENTALES PARA CRECIMIENTO
LUZ Mayoría Hongos pueden crecer sin o con poca luz (naturaleza, laboratorio) Luz visible y UV Efecto sobre diferenciación fúngica Disparador estructuras sexuales y asexuales (foto receptor tipo flavina) efecto s/ crecimiento vegetativo pigmentación carotenoides y melaninas (protección c/ especies reactivas O2 y UV)
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REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES in vitro
Mayoría hongos crecen en medios con compuestos naturales Agar Papa Dextrosa Agar Extracto Malta Agar Harina Maíz con alguna fuente nitrogenada ligeramente ácidos (pH 5 – 6)
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METABOLITOS PRIMARIOS
Se producen: en el curso de reacciones anabólicas o catabólicas durante la fase de crecimiento exponencial contribuyen a la producción de biomasa o energía
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METABOLITOS SECUNDARIOS
Se producen: al final del crecimiento exponencial o cuando el crecimiento es limitado por sustrato a partir de intermediarios del metabolismo central pero por vías enzimáticas especiales codificadas por genes específicos no son esenciales para el crecimiento o metabolismo central su producción tiende a ser género, especie o aún cepa-específica
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METABOLITOS SECUNDARIOS
Proceso necesario (independiente de productos finales) “Desborde” o válvula de escape de intermediarios cuando crecimiento
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Importancia ecológica y comercial
Antimicrobianos ATB (penicilinas, cefalosporinas) y ATF (griseofulvina) Pigmentos (melaninas y carotenos) protección contra UV y especies reactivas O2 Hormonas vegetales (giberelinas) en horticultura Promotores de diferenciación (hormonas sexuales fúngicas) Productos farmacéuticos (ciclosporina A) rechazo en transplantes Micotoxinas tóxicas hombre, animales y plantas Factores de patogenicidad
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Metabolitos primarios
En casi todos los µorg Importancia escencial No toxico para otros Aplicaciones farm. rara Celulosa Quitina Glucogeno Enzimas Otras proteinas Ac. Grasos Beta carotenos Metabolitos secundarios Solo en algunos Ninguna Variable Frecuentes aplicaciones farm. Ergotamina Ac. Lisérgico Penicilina Cefalosporina griseofulvina
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Metabolito Organismo productor propiedades Penicilina Penicillium chysogenum antibiótico Cefalosporina Cephalosporium acremonium Antibiótico Griseofulvina Penicillium griseofulvun Antifungico Ac. Fusidico Mucor remannianus ergotamina Claviceps purpurea Alcaloides del centeno Ac. Lisergico Claviceps paspali Alcaloides alucinogenos giberelinas Gibberia fujikurel Hormona vegetal
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Pruebas metabólicas para identificación
Fundamentales para muchas levaduras Útiles para pocos hongos filamentosos
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AUXONOGRAMA Asimilación capacidad de crecer en aerobiosis usando
≠ hidratos de carbono como única fuente de energía agar + fuente nitrogenada (NH4 + ) + discos con ≠ azúcares ≠ compuestos nitrogenados agar + fuente carbonada (Glu) + discos con ≠ compuestos nitrogenados
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AUXONOGRAMA Se prueban hasta 36 H de C: Monosacáridos (hexosas), Disacáridos, Trisacáridos, Polisacáridos, Pentosas, Alcoholes, Ac. orgánicos, Glicósidos
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Pruebas metabólicas para identificación
ZIMOGRAMA Fermentación capacidad de crecer en anaerobiosis usando ≠ hidratos de carbono y produciendo: CO2 (fermentación alcohólica) gas Ácido (fermentación láctica) Viraje de un indicador de pH
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Pruebas metabólicas para identificación
Asimilación; capacidad de crecer en aerobiosis usando H de C AUXONOGRAMA EQUIPOS API 20C Y 32C API 32C Galerías con 32 cúpulas 29 sustratos carbonados deshidratados control negativo sensibilidad a la cicloheximida prueba colorimétrica para la esculina Lectura visual o automatizada
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Pruebas metabólicas para identificación
ZIMOGRAMA Leyes de Kluever y Decker 1- Toda levadura que no fermenta glucosa, no fermenta ningún otro azúcar. 2- Toda levadura que fermenta glucosa, también fermenta fructosa y manosa. 3- Ninguna levadura fermenta a la vez maltosa y lactosa Se prueban sólo 6 hidratos de carbono glucosa, galactosa, sacarosa, maltosa, lactosa, trealosa
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