BRUCELLA.

Presentación del tema: "BRUCELLA."— Transcripción de la presentación:

1 BRUCELLA

2 TAXONOMIA Clase: Proteobacteria Subclase: Alfa Orden: Rizobiales Familia: Brucellaceae Género: Brucella

3 GENERO BRUCELLA abortus (8 biovars) suis (5 biovars)
HUÉSPEDES HABITUALES ESPECIE abortus (8 biovars) suis (5 biovars) melitensis (3 biovars) canis (1 biovar) ovis (1 biovar) neotomae (1 biovar) maris (2 biovars) BOVINO PORCINO CAPRINO OVINO CANINO ROEDORES MAMÍFEROS MARINOS

4 AISLAMIENTO DE LAS ESPECIES DE Brucella
Bruce - Br. melitensis del hombre Bang - Br. abortus de bovinos Traum - Br. suis de porcinos Buddle y Boyes - Br. ovis de ovinos Stoenner y Lackman - Br. neotomae de ratas Carmichael - Br. canis de caninos 1994 – Ross et al – Br. cetaceae de delfines, bufeos 1994 – Ross et al – Br. pinnipediae de focas

5 CARÁCTERÍSTICAS DEL MICROORGANISMO
COCOBACILO AEROBIO, GRAM NEGATIVO, INTRACELULAR FACULTATIVO. INMOVIL, NO ESPORULADO, NO CAPSULADO. SE TIÑE DE COLOR ROSADO CON LA TINCIÓN MODIFICADA DE ZIEHL-NIELSEN. NECESIDAD DE CO2

6 Intracelulares facultativos Intracelulares obligados
RELACIÓN CON LA CÉLULA HOSPEDADORA Membrana celular Intracelulares facultativos Intracelulares obligados Célula hospedadora Extracelulares

7 TIPOS CARACTERÍSTICOS DE ENVOLTURA
GRAM + GLUCOPÉPTIDO PROTEÍNAS ÁCIDO LIPOTEICOICO ÁCIDOS TEICURÓNICOS POLISACÁRIDOS AAR GLUCOPÉPTIDO POLIPÉPTIDOS GLUCOLÍPIDOS ÁCIDO MICÓLICO ARABINOGALACTANOS CERA DE SULFOLÍPIDOS MICÓSIDOS GRAM - GLUCOPÉPTIDO LIPOPROTEÍNAS MEMBRANA EXTERNA LIPOPOLISACÁRIDOS PROTEÍNAS FOSFOLÍPIDOS POLISACÁRIDOS

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10 ESTRUCTURA ANTIGÉNICA
B. abortus B. suis B. melitensis A M

11 catalasa FAGOSOMA Gránulo secundario 5´GMP NADPH oxidasa NADPH NADP+
primario Lisozima Proteasas Defensinas O-2 H+ SOD H2O2 catalasa Cl- Cl- MPO Lisozima Lactoferrina HOCl DEGRADACIÓN

12 Bacteria Sideróforo Célula Fe3+ Fe3+ Fe3+ Fe3+ Receptor Fe2+ Fe2+
Proteínas portadoras Bacteria Sideróforo Célula Lactoferrina Fe3+ Fe3+ Transferrina Fe3+ Fe3+ Receptor Fe2+ Hemoglobina Fe2+

13 POSIBLES MECANISMOS DE SUPERVIVENCIA
PERMANECE EN EL FAGOSOMA INTACTO Y BLOQUEA LA FUSIÓN POSTERIOR CON EL LISOSOMA DEBE RESISTIR POTENTES INTERMEDIARIOS DEL O2 (H2O2 Y RADICALES OXHIDRILOS) INHIBE EL ESTALLIDO RESPIRATORIO O LO PROVOCA MUY DÉBILMENTE Y DE CORTA DURACIÓN) SE PUEDE REFUGIAR FUERA DEL ALCANCE DEL LISOSOMA. SE DESCRIBIÓ SU PRESENCIA EN EL RER DE DIFERENTES CÉLULAS, AUNQUE NO EN MACRÓFAGOS PRODUCCIÓN DE GUANOSINA 5´MONOFOSFATO (GMP) Y ADENINA QUE INHIBEN FUSION FAGO-LISOSOMA, DEGRANULACIÓN, ACTIVACIÓN SISTEMA MIELOPEROXIDASA-HALURO Y LA PRODUCCIÓN DE TNF

14 Estrategias para evadir el sistema inmune
Cápsula externa Proteasas especificas IgAasa Peptidasa C5b Modificación de la estructura del antigeno LPS O Exotoxina citolitica que matan fagocitos Produciendo y viviendo dentro de un biofilm Evitando la fagocitosis Uniendo antigenos del hospedador a la superficie celular. Específicamente la proteina A y G con el receptor Fc de las inmunoglobulinas. Supervivencia dentro de fagocitos Producción de proteasa no especifica Invasión no fagocítica de las células

15 SELECCIÓN DE MUESTRAS SUERO, CALOSTRO, LECHE
FLUJO VAGINAL, PLACENTA Y COTILEDONES SEMEN LIQ. ABCESOS, HIGROMAS, BURSITIS ANIMALES VIVOS PRODUCTOS DE ABORTO CONTENIDO CUAJAR PULMÓN, BAZO MEMBRANAS FETALES

16 DISTRIBUCIÓN DE B abortus EN EL ANIMAL INFECTADO
TEJIDO O LIQ. ORGÁNICO PROBABILIDAD EN % CONT CUAJAR 98 PULMÓN ÓRGANOS FETO 95 LIQ. HIGROMAS 90 GANG. RETROMAMARIOS 80 GANG. ILÍACOS 65 TESTÍCULOS 60 LECHE 50 OTROS GANG. 10-30 BAZO 10 HÍGADO 5

17 DIAGNÓSTICO HISTOPATOLÓGICO SEROLÓGICO BACTERIOLÓGICO

18 DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO
Método de Köster Método de Ziehl-Neelsen modificado Inmunofluorescencia TÉCNICAS BACTERIOSCÓPICAS Medios sólidos Medios líquidos Medio difásico PROCEDIMIENTOS DE CULTIVO Cobayos Lauchas Hámsters INOCULACION EXPERIMENTAL

19 Diferenciación de especies
Ureasa requerimiento de CO2 producción de SH2 desarrollo en presencia de tionina desarrollo en presencia de fucsina aglutinación con sueros monoespecíficos tipificación por bacteriófagos

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24 MEDIO DE CASTAÑEDA Usado de humanos para hemocultivo

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27 INHIBICIÓN POR TIONINA

28 INHIBICIÓN POR FUCSINA

29 LISIS POR FAGO RESISTENCIA

30 COLORACIÓN DE STAMP COLORACIÓN DE STAMP COLORACIÓN DE STAMP

31 PRUEBAS PARA MEDIR E IDENTIFICAR LA RESPUESTA INMUNE
TEST DE ELISA INMUNOFLUORESCENCIA RADIOINMUNOENSAYO PRIMARIAS AGLUTINACIÓN PRECIPITACIÓN FIJ COMPLEMENTO SECUNDARIAS NEUTRALIZACIÓN PROTECCIÓN TERCIARIAS PRUEBAS BÁSICAS MOLECULARES PCR HIBRIDACIÓN

32 TÉCNICAS UTILIZADAS PRUEBA TAMIZ: BPA
PRUEBAS COMPLEMENTARIAS: 2 MERCAPTOETANOL - RIVANOL PRUEBA DEFINITORIA: FIJ COMPLEMENTO PRUEBA DE VIGILANCIA EPIDEMIOLÓGICA: PRUEBA ANILLO EN LECHE (PAL) OTRAS: ELISA-I, ELISA-C

33 SEROLOGÍA

34 PRUEBA DE BPA (ANTÍGENO BUFFERADO)

35 PRUEBA LENTA EN TUBO – 2 MERCAPTOETANOL

36 FIJACIÓN DE COMPLEMENTO

37 PRUEBA DEL ANILLO EN LECHE (PAL)

38 INMUNODIFUSIÓN EN GEL DE AGAR (AGID)

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