La descarga está en progreso. Por favor, espere

La descarga está en progreso. Por favor, espere

Caracterización y valor pronóstico de la expresión de c-Myb y B-Myb en Leucemia Mieloblástica Aguda Laboratorio de Biología Molecular Hospital La Fe.

Presentaciones similares


Presentación del tema: "Caracterización y valor pronóstico de la expresión de c-Myb y B-Myb en Leucemia Mieloblástica Aguda Laboratorio de Biología Molecular Hospital La Fe."— Transcripción de la presentación:

1 Caracterización y valor pronóstico de la expresión de c-Myb y B-Myb en Leucemia Mieloblástica Aguda Laboratorio de Biología Molecular Hospital La Fe

2 Pertenecen a una familia de factores de trascripción A-Myb Gónadas B-Myb Ubicuo c-Myb C.Hematoyéticas B-Myb y c-Myb

3 B-Myb Progenitor Ancestral RegulaciónTrans-activaciónUnión-DNA B-Myb progenitor ancestral c-Myb y A-Myb se originaron por duplicación durante la evolución

4 B-Myb y c-Myb Cromosoma 6 c-Myb 6q23 B-Myb 20q13 Cromosoma 20

5 Ratones homocigotos A-Myb inactivado Viables C-Myb inactivado Muerte etapa tardía in utero Fallo hematopoyesis (anemia severa) Muerte etapa tardía in utero Fallo hematopoyesis (anemia severa) B-Myb inactivado Muerte etapa temprana in utero Muerte etapa temprana in utero Myb en Ratones

6 B-Myb y c-Myb Correcta expresión Necesaria para función celular Gen Supresor Oncogen B-Myb Diferenciación terminal Proliferación c-Myb Desregulación ¿Desarrollo tumoral?

7 Objetivos 1.-Cuantificación expresión de B-Myb y c-Myb 2.-Asociación expresión de B-Myb y c-Myb - factores clínico-biológicos 3.- Valor pronóstico de B-Myb y c-Myb En Pacientes con LMA:

8 197 Leucemias Mieloblásticas Agudas Pacientes I

9 197 Leucemias Mieloblásticas Agudas Pacientes II

10 Cuantificación Relativa de la expresión de B-Myb y c- Myb Calibrador: Niveles CD34+ Muestras: Pacientes LMA Cuantificación Relativa (δδCt= δCtmuestra- δCtcalibrador ) Métodos B-Myb Gus TaqMan Expression Assay para B-Myb y c-Myb mRNA obtenido de MO cDNA

11 Resultados Expresión respecto CD34+ c-Myb0,26 (0,01-4,27) B-Myb2,46 (0,08-39,79) P=0,001 B-Myb c- Myb

12 Resultados c-Myb -Factores clinico-biológicos Niveles de c-Myb reducidos : mieloproliferación con aumento de trombopoyesis The Embo journal 2009

13 Resultados B-Myb- Factores clinico-biológicos Niveles de B-Myb elevados: Asociación de con otros tumores: Neuroblastoma, mama, próstata Malignidad Cancer Research 1999, Eur J cancer 2005

14 Resultados Valor Pronóstico de las LMA no M3 Expresión de c-Myb p=0,855 Expresión de B-Myb p=0,109

15 Resultados Valor Pronóstico de las LMA no M3 > Mediana (n=36) Mediana (n=44) B-Myb > Mediana (n=41) Mediana (n=39) c-Myb

16 Resultados Valor Pronóstico de las LMA no M3 ANÁLISIS MULTIVARIANTE p HR IC 95% Expresión B-Myb 0,039 2,33 (1,04-5,22) Edad ( 60 años) 0,02 3,47 (1,57-7,77) ANÁLISIS MULTIVARIANTE p HR IC 95% Expresión B-Myb 0,043 3,24 (1,04-10,13)

17 MECANISMOS MODIFICADORES DE LA ACTIVIDAD DE B-Myb

18 1. miRNA

19 miRNA

20

21 n=80 Expresión Western 1615b 30a30b 30c 30d 30e 29a 29b 29c

22 Obtención de células CD34+ de sangre de cordón CD34

23 MIMICS & INHIBITORS

24 2. POLIMORFISMO S427G

25 PCR Tiempo Real con sondas hibridación POLIMORFISMO S427G Puesta a punto con sondas hibridación Grupo control n=46 analizados Wild type n=35 Homocigotos n=2 Heterocigotos n=2

26 HRM región codificante 3. VARIACIONES GENÉTICAS 14 exones Puesta a punto exones: 2, 3, 4, 5, 6, 9,12,14 Mutado

27 n=35 4. ALTERACIONES GENÓMICAS 2 pacientes con trisomia en el cromosoma 6 (+6) EXP: 0.04 y 0.24 c-Myb: FISH

28 B-Myb: n=7 1 paciente con trisomia en el cromosoma 20 (+20) 3 pacientes con monosomía en el 20 (-20) EXP: 6.45 EXP: 0.96, 8.31 y 2.03 ALTERACIONES GENÓMICAS b-MYB RP11-69I10 RP11-354E16 RP11-464F7RP11-822E15* FISH Deleciones Traslocaciones


Descargar ppt "Caracterización y valor pronóstico de la expresión de c-Myb y B-Myb en Leucemia Mieloblástica Aguda Laboratorio de Biología Molecular Hospital La Fe."

Presentaciones similares


Anuncios Google