Application of PCR Prof. Dr. Baron 1 Aplicaciones de la PCR P C R Análisis de alimentos Diagnóstico médico Análisis medioambiental Medicina forense Arqueología.

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1 Application of PCR Prof. Dr. Baron 1 Aplicaciones de la PCR P C R Análisis de alimentos Diagnóstico médico Análisis medioambiental Medicina forense Arqueología Paleontología

2 Application of PCR Prof. Dr. Baron 2 Application of PCR for Diagnosis Diagnóstico de infecciones.

3 Application of PCR Prof. Dr. Baron 3 Diagnostico de Infecciones por PCR (selección) * ST = Shiga-like-Toxin Protocolo de la prueba Obtener muestra (sangre, suero, licor, frotis, pelo...) Aislar ADN Amplificar por PCR secuencias relevantes de ADN

4 Application of PCR Prof. Dr. Baron 4 Diagnosis of Infections by PCR Ventajas del diagnóstico por PCR Rápido diagnóstico en caso de largo periódo de cultivo de microorganismos (MOs), ejem. 3 semanas para mycobacteria, 4 hrs con PCR Diagnóstico de MOs que son dificiles de cultivar (cytomelalovirus, chlamydia) La cuantificación de los patógenos por PCR cuantitativa, importante para organizar una terapia apropiada y evaluar el éxito de la terapia. Para evitar terapias innecesarias o altas dosis. Para reducir efectos secundarios. Para recortar costes. Para evitar el desarrollo de MOs resistentes. ----------------------------------------------------------------------------

5 Application of PCR Prof. Dr. Baron 5 Application of PCR in Forensic Medicine PCR para huella genética

6 Application of PCR Prof. Dr. Baron 6 Huella genética con VNTR/STR Gen de mioglobina 4 repeticiones en tándem 33- repetición de par de bases Cromosomas homólogos

7 Application of PCR Prof. Dr. Baron 7 VNTR / STR para huella genética VNTR (Unidades de repetición de Tándem Diferentes) Cada repetición es 10 – 40 pares de bases (bp) de largo. Un locus VNTR contiene de 2 - 50 repeticiones. Hay varios cientos de loci VNTR en el genoma humano. El número de repeticiones varía de una persona a otra e incluso en una persona de cromosomas homólogos.

8 Application of PCR Prof. Dr. Baron 8 Huella genética con VNTR/STR Cromosomas homólogos Separación de repeticiones aplificadas por el gel de electroforesis

9 Application of PCR Prof. Dr. Baron 9 VNTR / STR for DNA Fingerprinting VNTR (Unidades de repetición de Tándem Diferentes) Cada repetición es 10 – 40 pares de bases (bp) de largo. Un locus VNTR contiene de 2 - 50 repeticiones. Hay varios cientos de loci VNTR en el genoma humano. El número de repeticiones varía de una persona a otra e incluso en una persona de cromosomas homólogos. STR (Repeticiones cortas en Tándem) Cada repetición es de 2 - 10 bp de largo. Un locus STR contiene: 10 - 50 repeticiones Varios cientos de loci STR en el genoma humano Identificación de 1:6 billones con 8 STR loci, 1:10 17 con 16 STR loci Protocolo del test Aislar ADN del material biológico (sangre, saliva, tejidos, pelos...)  multiplex PCR  (capilaridad) gel electroforesis  leer Applicación Medicina Forense, test de paternidad, alimentación animal, control de carnes,identificación celular ej. Células cancerígenas...