Coliformes, Coliformes Fecales and E. coli

Presentación del tema: "Coliformes, Coliformes Fecales and E. coli"— Transcripción de la presentación:

1 Coliformes, Coliformes Fecales and E. coli
Laboratorio de Microbiologia de Alimentos

2 Coliformes Aerobicos y facultativos anaerobicos Gram negativo
No formadores de esporas Forma de bacilo Fermentan lactosa, con produccion de acido y gas dentro de 48 hr a 35 C

3 Coliformes- Porque son importantes
Organismo indicador (no necesariamente un patogeno) Coliformes fecales Potencial contaminate en carne Patogeno potencial Enterobacter en formula de infantes Coliformes no fecales – agua, suelo, ambiente

4 Métodos para Detectar Coliformes
MPN Basado en probabilidad estadistica NO es contaje directo Técnica líquida Sólido Contaje directo en medio

5 Coliforms

6 MPN - Continuación El objetivo es “diluir el organismo
Seleccione la muestra más diluída con todos los tubos positivos y los próximos dos 3,2,1 – Nuestra combinación Determine el MPN utilizando la tabla de MPN

7 Coliformes

8 MPN Puede tambien utilizarse 5 tubos para MPN – Aumenta la exactitud
EXACTITUD – Cuan cercano a los valores reales PRECISION – Cuan cercano son los números uno al otro Asegúrate de usar la tabla apropiada

9 Se asume en MPN Distribución al azar de la bacteria
Los organismos no se aglutinan Si hay un microorganismo presente, crecera Existen las condiciones apropiadas para crecer

10 Ventajas sobre el uso de placas
El tamano de la muestra puede ser mayor Mejor para números bajos de organismos El medio líquido es más suave para el organismo porque no se expone al calor Requiere preparación de medio con antelación

11 Medio - LST Lauryl Sulfate Tryptose Broth
Prueba PRESUMPTIVA para coliformes Se informa como “presumptive coliforms/g” Ingredientes Lauryl Sulfate – Algunas bacterias no pueden crecer - Selectivo Lactosa – Producción de gas – Diferencial w/durham tubo NaCl – Aumenta razón de reproducción Tryptona – Fuente de Nitrógeno Incube a 35 C por 48 horas

12 Medio - BGLB Brilliant Green Lactose Bile Incube a 35 C por 48 horas
Producción de gas – Positivo Ingredientes Oxgall – forma de bilis Brilliant Green Dye – Inhibe Gram + Resultados son coliformes confirmados No utilize BGLB directamente – Altamente inhibitorio

13 Medio – EMB Agar Eosine Methylene Bule Agar Placas ya servidas
Estriado para aislar del MPN Ingredientes - Diferencial Peptona – Proteina Lactosa – Produccion de acido Tinte Eosine – Inhibitorio Azul de metileno – Indicador de pH E. coli and Enterobacer Nucleated, dark centered, with or without a metallic green sheen – CONFIRMED COLIFORMS

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16 Método Sólido VRBA Violet Red Bile Agar Peptone – Nitrogen Source
Lactose – Acid Production Neutral Red – Indicator (6.8 red, 8.0 yellow) Crystal Violet – Inhibits Gram + NaCl – Increase Growth Rate Bile Salts

17 VRBA Típica – Rojo-púrpura, Colonias Elípticas, puede ser una zona de precipitación Se recomiendan placas con colonias– Colonias más grandes Ponga una capa de agar luego que la primera solidifique Resultados – Presumptive Coliformes

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