Por Donde Empezar!!. Situaciones Caza ilegal: caza, pesca Adulteración de especies o fraude de alimentos Especies en peligro: el tráfico ilegal Casos.

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1 Por Donde Empezar!!

2 Situaciones Caza ilegal: caza, pesca Adulteración de especies o fraude de alimentos Especies en peligro: el tráfico ilegal Casos forenses: el abuso, el robo, la evidencia encontrada en la escena "humano " del delito Brotes de enfermedades, las zoonosis (tuberculosis, la EEB, etc) No hay datos morfológicos disponibles

3 Los métodos disponibles Electroforesis de proteínas – El calor desnaturaliza en los alimentos procesados ADN, basados en la PCR – ¿ Específicos o universales especies? ¿Qué métodos utilizar? – ¿ En tiempo real PCR, RFLP, secuenciación, otros? Hueso, marfil, plumas, materia fecal, sangre – ¿ Muestras difíciles necesitan técnicas diferentes?

4 ¿Qué marcadores se utilizan? ¿ Microsatélites? ¿Las diferentes especies? – ¿ Los pros y los contras? ADNmt – D-loop, 12S, 16S – Citocromo B, gen COI (citocromo c oxidasa) – ¿ Los pros y los contras? ¿ Marcadores universal? ¿ Bases de datos? – ¿ Los pros y los contras?

5 Cit B vs CO1 Tobe et al, Genética FSI Las pruebas fueron primero una adaptación de los estudios filogenéticos (citb) – Universal de los cebos, la secuencia; pero no hay directrices en cuanto a lo que la variación porcentual fue; exclusión o inclusión Código de barras del ADN (CO1) en 2003, para la identificación y taxonomía – Secuenciación, los cebadores universales, base de datos disponible en línea, a continuación, comparar con secuencia de referencia

6 Estudio echo por Tobe En comparación con 236 diferentes mamíferos, pedidos 29 con ambos marcadores Found size of each gene to be variable between species but invariable w/in same species Tamaño encontrados de cada gen es variable entre las especies, pero invariable en una misma especie – Citocromo B (1149 bases) 22,4% (257 pb) se conserva en todas las muestras – CO1 (1557bp) 43.7% (680 bases) se conservaron Entre especie usando humanos, vaca, y perro – 82%,97&, 98% homólogo (cit b) – 88%, 97% and 98% en CO1 Fue concluido que citocromo b trabajó mejor en los fragmentos pequeños (degradados) y en variación dentro de las especies

7 Uso presunto de ID de ADN mitocondrial Citocromo B universal; cebador adelante y atrás que son específicos de especie Animales domésticos Multiplexado

8 Un método rápido y simple para la identificación de las especies de carne y productos cárnicos mediante PCR Linea 1 – KB Ladder Linea 2 – Cabra Linea 3 – Cabra Linea 4 – Pollo Linea 5 – Pollo Linea 6 – Equino Linea 7 – Equino Linea 8 – Bovino Linea 9 – Bovino Linea 10 – PCR - control 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Ciencia carne, Volumen 51, Número 2, febrero de 1999, páginas 143-148T. Matsunaga, K. Chikuni, R. Tanabe, S. Muroya, K. Shibata, J. y Y. Yamada Shinmura

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10 ¿Preguntas?