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Laboratorio en reumatología Adolfo Pacheco Salazar Servicio de Reumatología, Hospital Calderón Guardia.

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Presentación del tema: "Laboratorio en reumatología Adolfo Pacheco Salazar Servicio de Reumatología, Hospital Calderón Guardia."— Transcripción de la presentación:

1 Laboratorio en reumatología Adolfo Pacheco Salazar Servicio de Reumatología, Hospital Calderón Guardia

2 Aspectos a abordar Reactantes de fase aguda Sistema del complemento Factor reumatoide, Péptido cíclico citrulinado HLA-B27 Anticuerpos antinucleares Anticuerpos contra el citoplasma de los neutrófilos Líquido sinovial

3 Reactantes de fase aguda

4 Inflamación Respuesta local a la lesión de los tejidos Respuesta de fase aguda Alteraciones sistémicas y metabólicas producto del estímulo inflamatorio Participantes en la respuesta inmune innata

5 Proteínas plasmáticas de fase aguda Principales Proteínas C reactiva Amiloide A sérico Moderadas Fibrinógeno Haptoglobina Menores Complemento C3 Negativas Albúmina Transferrina

6 Proteína C reactiva, amiloide A sérico Proteínas plasmáticas de origen hepático Síntesis estimulada por citoquinas inflamatorias, IL-6 principal inductor

7 Proteína C reactiva Unión inmunidad innata-adquirida Respuesta inflamatoria precoz Capacidad de reconocimiento Fosfolípidos, histonas Capacidad de activación Vía clásica del complemento, unión a receptores Fc gamma

8 Cambios en la concentración de PCR Estímulo inflamatorio agudo 6 horas, supera límite normal 48 horas, pico Ausencia de estímulo inflamatorio Descenso rápido, semivida de 18 horas

9 Valores de PCR Elevación leve (<1 mg/dl) Elevación moderada (1-10 mg/dl) Elevación notable (>10 mg/dl) Ejercicio intenso IVRS, gingivitis Embarazo Crisis convulsivas Resistencia a la insulina Obesidad Infarto agudo al miocardio Neoplasias malignas Pancreatitis Infección de mucosas Enfermedades del colágeno Infección bacteriana Trauma severo Vasculitis sistémica

10 Amiloide A sérico Función no está clara Respuesta a estímulo inflamatorio Aumento en pocas horas Elevación supera a la de PCR No hay pruebas fiables de uso generalizado Información escasa sobre valores esperados

11 Velocidad de eritrosedimentación Proceso Sangre anticoagulada en un tubo vertical Velocidad a la que descienden eritrocitos

12 Medición indirecta del aumento de proteínas de fase aguda Disminuye tendencia de eritrocitos a repelerse Formación de pilas de monedas Aumento de proteínas cargadas, asimétricas Fibrinógeno Aumento de una especie molecular Inmunoglobulinas

13 Técnica de Westergren Límites normales Menores de 50 años <15 mm/h varones <20 mm/h mujeres Mayores de 50 años <20 mm/h varones <30 mm/h mujeres

14 Causas de elevación de VES Edad Embarazo Anemia Obesidad Diabetes mellitus Insuficiencia renal Infección Malignidad Enfermedad del colágeno Inflamación

15 Sistema del complemento

16 Funciones

17

18 Medición del complemento C4 (mg/dl)C3 (mg/dl)Interpretación Rango normal 40200Respuesta de fase aguda 1080Activación de la vía clásica 3050Activación de la vía alternativa

19 Factor reumatoide

20 Anticuerpo contra el fragmento cristalizable de la IgG IgA, IgM, IgG

21 Enfermedades asociadas con el FR Enfermedades del colágeno AR LES, esclerosis sistémica, EMTC, Sjögren Infecciones viralesVIH, mononucleosis, hepatitis, vacunación Infecciones parasitariasTripanosomiasis, malaria, esquistosomiasis, filariasis Infecciones bacterianas crónicas Tuberculosis, lepra, sífilis, brucelosis, endocarditis bacteriana subaguda, salmonelosis NeoplasiasEnfermedades linfoproliferativas Estados hiperglobulinémicos Púrpura hipergammaglobulinémica, crioglobulinemia, enfermedad hepática crónica, sarcoidosis, enfermedades pulmonares crónicas

22 FR en artritis reumatoide Prueba de aglutinación con látex 70% positividad Nefelometría 80% positividad

23 Nefelometría

24 Valores Diluciones Unidades internacionales < 1:20 normal 1:20-1:80 dudoso > 1:80 positivo < 14 normal dudoso > 40 positivo

25 Papel fisiológico del FR IgM Durante la respuesta inmune secundaria FR IgM en superficie de células B Unión a complejos inmunes facilita presentación antigénica FR IgM secretado Eliminación de inmunocomplejos

26 Anticuerpos contra Péptidos cíclicos citrulinados

27 Descubrimiento Anticuerpos contra queratina Descritos por primera vez en década 1970 Antígeno primario filagrina Citrulina Epítopo de la filagrina al cual se unen los anticuerpos Citrulina se forma por modificación enzimática del aminoácido arginina

28 Artritis reumatoide Determinación de anti-PCC Sensibilidad 70% Especificidad 98%

29 Título de Anti-PCC Unidades < 19 negativo positivo débil positivo moderado > 60 positivo fuerte

30 HLA-B27

31 HLA, antígenos leucocitarios humanos Glucoproteínas codificadas por el MHC

32 Complejo principal de histocompatibilidad

33 HLA-B27 en espondiloartropatías EnfermedadFrecuencia en caucásicos (%) Espondilitis anquilosante90 Artritis reactiva70 Artritis enteropática50

34 Anticuerpos antinucleares

35 Métodos de detección Inmunofluorescencia Suero a varias diluciones con células sustrato IgG antihumana con fluoresceína Título 1:40 es positivo

36

37 Ensayo de inmunoabsorción ligado a enzima 1. Sueros en pocillos recubiertos por antígenos diana 2. Anticuerpo antiinmunoglobulina humana conjugado con enzima 3. Sustrato enzimático

38 PatologíaPacientes con ANA (%) Lupus eritematoso sistémico Lupus inducido por fármacos100 Enfermedad mixta del tejido conectivo100 Esclerosis sistémica97 Polimiositis/ dermatomiositis40-80 Síndrome de Sjögren48-96 Artritis reumatoide30-50 Síndrome antifosfolípido40-50 Familiares de pacientes con enfermedades inmunes5-25 Sano 1: Sano 1: Sano 1:1605 Sano 1:3203

39 Otras enfermedades que presentan ANA PatologíaPacientes con ANA (%) Hepatitis autoinmune100 Esclerosis múltiple25 Púrpura trombocitopénica idiopática10-30 Enfermedad tiroidea30-50 Enfermedades infecciosasMuy variable Neoplasias malignasMuy variable

40 EspecificidadPatrón de inmunofluorescencia Asociaciones Nuclear asociada a cromatina ds-DNAAnillo, homogéneoLES HistonasAnillo, homogéneoLupus por medicamentos CentrómeroMoteadoEsclerosis sistémica limitada Nuclear, del aparato de splicing SmMoteadoLES U1 sn RNPMoteadoEMTC Nuclear, otras ribonucleoproteínas Ro/SS-A, La/SS-BMoteadoSjögren, LES, lupus cutáneo subagudo, lupus neonatal Nucleolares Topoisomerasa I (Scl-70)Homogéneo, nucleolarEsclerosis sistémica difusa Citoplásmicas Histidil tRNA sintetasa (Jo-1) HomogéneoPolimiositis, dermatomiositis

41 Antígenos nucleares extraíbles (ENA) Extraíbles Inmunodifusión Sm Sn RNP Ro La Topoisomerasa I tRNA sintetasas

42 Anticuerpos contra el citoplasma de los neutrófilos (ANCA)

43 ANCA Inmunofluorescencia c-ANCA citoplásmico p-ANCA peinuclear

44 Vasculitis

45 Antígenos c-ANCA Proteinasa 3 Asociación con Granulomatosis de Wegener Responsable del 90% de patrones citoplásmicos p-ANCA Mieloperoxidasa Asociación con Poliangiitis Microscópica, Churg-Strauss Responsable del 10% de patrones perinucleares

46 Líquido sinovial

47 Ultrafiltrado del plasma Síntesis local de proteínas Solutos (urea, uratos, creatinina) Proteínas plasmáticas Lubricina, Hialuronato Inmunoglobulinas, citocinas

48 Análisis del líquido sinovial Aspecto macroscópico Recuento de leucocitos Composición bioquímica Presencia de cristales Tinción de Gram, cultivo

49 Tipos de líquido sinovial CaracterísticaNormalNo inflamatorioInflamatorioSéptico AspectoTransparente TraslúcidoTraslúcido a turbio ViscosidadAlta Baja Leucocitos por mm3< >50000 % PMN<10% Variable, cristales >90 >90 Entidades-Artrosis, traumaArtritis reumatoide, espondiloartropatías, artritis por cristales Artritis séptica Artritis por cristales Gota, forma de aguja, urato monosódico monohidratado, birrefringencia negativa intensa Pseudogota, cristales romboidales de pirofosfato cálcico, birrefringencia positiva débil Líquido hemorrágico Hemartrosis

50 Coágulo de mucina Líquido sinovial Ácido acético 2% Aglomerado hialuronato- proteína (mucina)

51 Anemia de enfermedad crónica

52 Causa: Citocinas inflamatorias Liberación de IFN-y Suprime respuesta de la médula a la eritropoyetina IL 1, TNF Síntesis de Hepcidina por hepatocitos Suprime absorción de hierro, salida desde sitios de almacenamiento IL 6

53 Anemia de enfermedad crónica Anemia normocítica-normocrómica Hemoglobina >10 g/dl Índices férricos Sideremia baja Capacidad de fijación de hierro disminuida Saturación de transferrina disminuida Ferritina sérica normal o aumentada (3x el basal)


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