Laboratorio en reumatología

Presentación del tema: "Laboratorio en reumatología"— Transcripción de la presentación:

1 Laboratorio en reumatología
Adolfo Pacheco Salazar Servicio de Reumatología, Hospital Calderón Guardia

2 Aspectos a abordar Reactantes de fase aguda Sistema del complemento
Factor reumatoide, Péptido cíclico citrulinado HLA-B27 Anticuerpos antinucleares Anticuerpos contra el citoplasma de los neutrófilos Líquido sinovial

3 Reactantes de fase aguda

4 Reactantes de fase aguda
Inflamación Respuesta local a la lesión de los tejidos Respuesta de fase aguda Alteraciones sistémicas y metabólicas producto del estímulo inflamatorio Participantes en la respuesta inmune innata

5 Proteínas plasmáticas de fase aguda
Principales Proteínas C reactiva Amiloide A sérico Moderadas Fibrinógeno Haptoglobina Menores Complemento C3 Negativas Albúmina Transferrina

6 Proteína C reactiva, amiloide A sérico
Proteínas plasmáticas de origen hepático Síntesis estimulada por citoquinas inflamatorias, IL-6 principal inductor

7 Proteína C reactiva Unión inmunidad innata-adquirida
Respuesta inflamatoria precoz Capacidad de reconocimiento Fosfolípidos, histonas Vía clásica del complemento, unión a receptores Fc gamma Capacidad de activación

8 Cambios en la concentración de PCR
Estímulo inflamatorio agudo 6 horas, supera límite normal 48 horas, pico Ausencia de estímulo inflamatorio Descenso rápido, semivida de 18 horas

9 Valores de PCR Elevación leve (<1 mg/dl)
Elevación moderada (1-10 mg/dl) Elevación notable (>10 mg/dl) Ejercicio intenso IVRS, gingivitis Embarazo Crisis convulsivas Resistencia a la insulina Obesidad Infarto agudo al miocardio Neoplasias malignas Pancreatitis Infección de mucosas Enfermedades del colágeno Infección bacteriana Trauma severo Vasculitis sistémica

10 Amiloide A sérico Función no está clara
Respuesta a estímulo inflamatorio Aumento en pocas horas Elevación supera a la de PCR No hay pruebas fiables de uso generalizado Información escasa sobre valores esperados

11 Velocidad de eritrosedimentación
Proceso Sangre anticoagulada en un tubo vertical Velocidad a la que descienden eritrocitos

12 Medición indirecta del aumento de proteínas de fase aguda
Disminuye tendencia de eritrocitos a repelerse Formación de “pilas de monedas” Aumento de proteínas cargadas, asimétricas Fibrinógeno Aumento de una especie molecular Inmunoglobulinas

13 Técnica de Westergren Límites normales Menores de 50 años
<15 mm/h varones <20 mm/h mujeres Mayores de 50 años <20 mm/h varones <30 mm/h mujeres

14 Causas de elevación de VES
Edad Embarazo Anemia Obesidad Diabetes mellitus Insuficiencia renal Infección Malignidad Enfermedad del colágeno Inflamación

15 Sistema del complemento

16 Funciones

17

18 Medición del complemento
C4 (mg/dl) C3 (mg/dl) Interpretación 16-40 Rango normal 40 200 Respuesta de fase aguda 10 80 Activación de la vía clásica 30 50 Activación de la vía alternativa

19 Factor reumatoide

20 Factor reumatoide Anticuerpo contra el fragmento cristalizable de la IgG IgA, IgM, IgG

21 Enfermedades asociadas con el FR
Enfermedades del colágeno AR LES, esclerosis sistémica, EMTC, Sjögren Infecciones virales VIH, mononucleosis, hepatitis, vacunación Infecciones parasitarias Tripanosomiasis, malaria, esquistosomiasis, filariasis Infecciones bacterianas crónicas Tuberculosis, lepra, sífilis, brucelosis, endocarditis bacteriana subaguda, salmonelosis Neoplasias Enfermedades linfoproliferativas Estados hiperglobulinémicos Púrpura hipergammaglobulinémica, crioglobulinemia, enfermedad hepática crónica, sarcoidosis, enfermedades pulmonares crónicas

22 FR en artritis reumatoide
Prueba de aglutinación con látex 70% positividad Nefelometría 80% positividad

23 Nefelometría

24 Valores < 1:20 normal 1:20-1:80 dudoso > 1:80 positivo
Diluciones Unidades internacionales < 1:20 normal 1:20-1:80 dudoso > 1:80 positivo < 14 normal 14-40 dudoso > 40 positivo

25 Papel fisiológico del FR IgM
Durante la respuesta inmune secundaria FR IgM en superficie de células B Unión a complejos inmunes facilita presentación antigénica FR IgM secretado Eliminación de inmunocomplejos

26 Anticuerpos contra Péptidos cíclicos citrulinados

27 Descubrimiento Anticuerpos contra queratina Citrulina
Descritos por primera vez en década 1970 Antígeno primario filagrina Citrulina Epítopo de la filagrina al cual se unen los anticuerpos Citrulina se forma por modificación enzimática del aminoácido arginina

28 Artritis reumatoide Determinación de anti-PCC Sensibilidad 70%
Especificidad 98%

29 Título de Anti-PCC Unidades < 19 negativo 20-39 positivo débil
40-59 positivo moderado > 60 positivo fuerte

30 HLA-B27

31 HLA, antígenos leucocitarios humanos
Glucoproteínas codificadas por el MHC

32 Complejo principal de histocompatibilidad

33 HLA-B27 en espondiloartropatías
Enfermedad Frecuencia en caucásicos (%) Espondilitis anquilosante 90 Artritis reactiva 70 Artritis enteropática 50

34 Anticuerpos antinucleares

35 Métodos de detección Inmunofluorescencia
Suero a varias diluciones con células sustrato IgG antihumana con fluoresceína Título ≥1:40 es positivo

36

37 Ensayo de inmunoabsorción ligado a enzima
Sueros en pocillos recubiertos por antígenos diana Anticuerpo antiinmunoglobulina humana conjugado con enzima Sustrato enzimático

38 Patología Pacientes con ANA (%) Lupus eritematoso sistémico 99-100 Lupus inducido por fármacos 100 Enfermedad mixta del tejido conectivo Esclerosis sistémica 97 Polimiositis/ dermatomiositis 40-80 Síndrome de Sjögren 48-96 Artritis reumatoide 30-50 Síndrome antifosfolípido 40-50 Familiares de pacientes con enfermedades inmunes 5-25 Sano ≥1:40 20-30 Sano ≥1:80 10-12 Sano ≥1:160 5 Sano ≥1:320 3

39 Otras enfermedades que presentan ANA
Patología Pacientes con ANA (%) Hepatitis autoinmune 100 Esclerosis múltiple 25 Púrpura trombocitopénica idiopática 10-30 Enfermedad tiroidea 30-50 Enfermedades infecciosas Muy variable Neoplasias malignas

40 Especificidad Patrón de inmunofluorescencia Asociaciones Nuclear asociada a cromatina ds-DNA Anillo, homogéneo LES Histonas Lupus por medicamentos Centrómero Moteado Esclerosis sistémica limitada Nuclear, del aparato de splicing Sm U1 sn RNP EMTC Nuclear, otras ribonucleoproteínas Ro/SS-A, La/SS-B Sjögren, LES, lupus cutáneo subagudo, lupus neonatal Nucleolares Topoisomerasa I (Scl-70) Homogéneo, nucleolar Esclerosis sistémica difusa Citoplásmicas Histidil tRNA sintetasa (Jo-1) Homogéneo Polimiositis, dermatomiositis

41 Antígenos nucleares extraíbles (ENA)
Inmunodifusión Sm Sn RNP Ro La Topoisomerasa I tRNA sintetasas

42 Anticuerpos contra el citoplasma de los neutrófilos (ANCA)

43 ANCA Inmunofluorescencia c-ANCA citoplásmico p-ANCA peinuclear

44 Vasculitis

45 Antígenos c-ANCA p-ANCA Proteinasa 3 Mieloperoxidasa
Asociación con Granulomatosis de Wegener Responsable del 90% de patrones citoplásmicos p-ANCA Mieloperoxidasa Asociación con Poliangiitis Microscópica, Churg-Strauss Responsable del 10% de patrones perinucleares

46 Líquido sinovial

47 Líquido sinovial Solutos (urea, uratos, creatinina)
Ultrafiltrado del plasma Síntesis local de proteínas Solutos (urea, uratos, creatinina) Proteínas plasmáticas Lubricina, Hialuronato Inmunoglobulinas, citocinas

48 Análisis del líquido sinovial
Aspecto macroscópico Recuento de leucocitos Composición bioquímica Presencia de cristales Tinción de Gram, cultivo

49 Tipos de líquido sinovial
Característica Normal No inflamatorio Inflamatorio Séptico Aspecto Transparente Traslúcido Traslúcido a turbio Viscosidad Alta Baja Leucocitos por mm3 <200 >50000 % PMN <10% Variable , cristales >90 >90 Entidades - Artrosis, trauma Artritis reumatoide, espondiloartropatías, artritis por cristales Artritis séptica Artritis por cristales Gota, forma de aguja, urato monosódico monohidratado, birrefringencia negativa intensa Pseudogota, cristales romboidales de pirofosfato cálcico, birrefringencia positiva débil Líquido hemorrágico Hemartrosis

50 Aglomerado hialuronato-proteína (mucina)
Coágulo de mucina Líquido sinovial Ácido acético 2% Aglomerado hialuronato-proteína (mucina)

51 Anemia de enfermedad crónica

52 Causa: Citocinas inflamatorias
IL 1, TNF Liberación de IFN-y Suprime respuesta de la médula a la eritropoyetina IL 6 Síntesis de Hepcidina por hepatocitos Suprime absorción de hierro, salida desde sitios de almacenamiento

53 Anemia de enfermedad crónica
Anemia normocítica-normocrómica Hemoglobina >10 g/dl Índices férricos Sideremia baja Capacidad de fijación de hierro disminuida Saturación de transferrina disminuida Ferritina sérica normal o aumentada (3x el basal)