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Publicada porCatalina Montoya Maidana Modificado hace 7 años
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TP N° 4-5 COLORACIONES I y II ANAEROBIOSIS RECUENTO Microbiología Tecnicatura Universitaria en Esterilización 2016
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Formas de las bacterias
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Diferentes agrupaciones de cocos estreptococos sarcinas estafilococos diplococos
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Diferentes morfologías en bacilos
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Espirilo Espiroqueta
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OBSERVACIÓN DE MICROORGANISMOS Examen en fresco (vivos sin teñir) Técnicas de coloración
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COLORANTES -Son compuestos orgánicos y cada tipo de colorante suele tener afinidad por determinadas estructuras celulares. -Colorantes catiónicos: - Son sales que en medio acuoso: Cl AM --- Cl - + AM + (azul de metileno) se combinan con compuestos celulares con carga negativa, ej.: ácidos nucleicos y polisacáridos ácidos.
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COLORACIÓN VITAL o PREPARADO EN FRESCO Permite visualizar si los microorganismos son: -móviles -inmóviles En qué consiste?
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TÉCNICAS DE COLORACIÓN Cultivos bacterianos: 18 - 24 h Preparación del frotis 1.Secado 2.Fijación -Métodos físicos: calor -Métodos químicos 3. Enfriado 4.Coloración (simple o compuesta) 5. Lavado 6.Secado 7.Observar en microscopio 100x con aceite de inmersión Fijación: preserva las estructuras y las hace más visibles
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COLORACIÓN de GRAM Divide a las bacterias en 2 grandes grupos: -Gram positivas (violeta) -Gram negativas (rojizas)
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Coloración de Gram
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Bacterias y esporas según la coloración de Gram
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TINCION DE ZIEHL NEELSEN Para bacterias ácido alcohol resistentes (BAAR) Ej.: Mycobacterium tuberculosis Estructura de la pared
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COLORACION DE ZIEHL-NEELSEN (para BAAR) Frotis. Fucsina Ziehl concentrada, (calentar con hisopo encendido hasta emisión de vapores durante 10 min) Alcohol-ácido Lavar Azul de metileno Lavar-Secar Observar 100x
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ANAEROBIOSIS 1.Qué es? 2. Sistemas de incubación para anaerobios 3.Métodos para generar anaerobiosis (leer por Guía de TP)
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RECUENTO DE MICROORGANISMOS VIABLES 1°. Diluir la muestra 2°. Sembrar
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-Por extensión en superficie: 1°) la muestra 2°) el medio de cultivo - Por placa vertida: 1°) la muestra 2°) el medio de cultivo
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Cálculo: (elegir la dilución donde hay 30-300 colonias) 10 -1 : 800 / 600 10 -2 : 70 / 90 10 -3 : 6 / 4 Promedio: 80 col (A) A x inv. del volumen sembrado x inv. de la dilución = B ufc/ml Recuento de microorganismos viables
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