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CONTROL CON MICROONDAS DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis.

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2 CONTROL CON MICROONDAS DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis

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4 JUSTIFICACIÓN DEL TRABAJO Fusarium oxysporum f. sp. melonis ataca al melón produciendo una enfermedad conocida como Fusariosis vascular, Marchitez vascular o Traqueomicosis n 1.- Distribución geográfica de la enfermedad n 2.- Importancia económica de la enfermedad n 3.- Necesidad de investigación de nuevos métodos de control dada la limitaciones de los ya existentes. n 4.- Posibilidad de utilización del microondas como método de control

5 Cuadro 1. Producción y superficie destinada al cultivo de melón en España

6 OBJETIVOS n Parte experimental I: Estudio de la influencia del tratamiento térmico con microondas sobre la viabilidad del inóculo de F. oxysporum f. sp. melonis. n Parte experimental II: Estudio de la influencia del tratamiento térmico con microondas sobre la patogenicidad de F. oxysporum f. sp. melonis en plántulas de melón. n Parte experimental III: Estudio de la influencia del tratamiento térmico con microondas sobre la viabilidad del inóculo de F. oxysporum f. sp. melonis en substratos infestadosy comparar la efectividad del tratamiento cuando varía el grado de humedad del substrato. n Parte experimental III: Estudio de la influencia del tratamiento térmico con microondas sobre la viabilidad del inóculo de F. oxysporum f. sp. melonis en substratos infestados y comparar la efectividad del tratamiento cuando varía el grado de humedad del substrato. n Parte experimental IV: Estudio de la influencia del tratamiento con microondas sobre un substrato que contiene clamidosporas de F. oxysporum f. sp. melonis n Parte experimental IV: Estudio de la influencia del tratamiento con microondas sobre un substrato que contiene clamidosporas de F. oxysporum f. sp. melonis.

7 PARTE EXPERIMENTAL I

8 n Se estudió la influencia del tratamiento con microondas sobre la viabilidad de conidias de Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 2 en suspensiones acuosas n Se realizaron dos ensayos – 10 5 conidias/ml (concentración de la suspensión acuosa) –Ensayo 1: 10 5 conidias/ml (concentración de la suspensión acuosa) – 5·10 5 conidias/ml (concentración de la suspensión acuosa) –Ensayo 2: 5·10 5 conidias/ml (concentración de la suspensión acuosa)

9 n Incremento del inóculo n Tratamiento térmico con microondas n Viabilidad del inóculo MÉTODO

10 Figura 1.- Filtrado de la suspensión de inóculo de Fusarium oxysporum f. sp melonis raza 2.

11 MÉTODO : Tratamiento térmico con microondas n 10 ml suspensión ajustada en cada tubo de ensayo de 30ml de capacidad n Se realizan 15 tratamientos distintos: –Tiempos: 1 minuto, 3 minutos, 6 minutos, 9 minutos y 12 minutos. –Potencia: baja potencia (100w), media potencia (500w) y alta potencia (1000w).

12 MÉTODO : Viabilidad del inóculo n Método de las diez diluciones n Las placas inoculadas se mantienen en estufa a 27ºC n Conteo diario del nº de u.f.c. que aparecen en cada una de las placas

13 DILUCIÓN 1 DILUCIÓN 2 DILUCIÓN 3 1 ml Así sucesivamente hasta realizar 10 diluciones 1 ml MÉTODO DE LAS DIEZ DILUCIONES

14 RESULTADOS PARTE EXPERIMENTAL I

15 ENSAYO I

16 EFICACIA DE LOS DISTINTOS TRATAMIENTOS CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD Fusarium oxysporum f. sp. melonis Raza 2 EN SUSPENSIONES ACUOSAS ENSAYO I

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18 ENSAYO I ENSAYO I RESUMEN DEL ANÁLISIS ESTADÍSTICO

19 ENSAYO II

20 EFICACIA DE LOS DISTINTOS TRATAMIENTOS CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD Fusarium oxysporum f. sp. melonis Raza 2 EN SUSPENSIONES ACUOSAS ENSAYO II

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22 ENSAYO II ENSAYO II RESUMEN DEL ANÁLISIS ESTADÍSTICO

23 COMPARACIÓN DE LA EFICACIA DEL TRATAMIENTO A BAJA POTENCIA (100W) CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 EN SUSPENSIONES ACUOSAS

24 CONCLUSIONES PARTE EXPERIMENTAL I

25 CONCLUSIONES PARTE EXPERIMENTAL I 1.- El tratamiento térmico con microondas reduce la viabilidad del inóculo de Fusarium oxysporum f. sp. melonis Raza Los tratamientos durante 1 minuto y 3 minutos a baja potencia produce ya una reducción de la viabilidad del inóculo del hongo.

26 CONCLUSIONES PARTE EXPERIMENTAL I 3.- En los tratamientos de 1 y 3 minutos a media y alta potencia, así como en los de 6, 9 y 12 minutos (baja, media y alta potencia) se consigue la erradicación del inóculo. 4.- La eficacia obtenida en los tratamientos de 1 y 3 minutos a baja potencia depende de la concentración del inóculo, ya que en el Ensayo 1 en el que el inóculo tiene menor concentración la eficacia obtenida es mayor que en el Ensayo 2.

27 PARTE EXPERIMENTAL II

28 n Estudio de la influencia del tratamiento con microondas sobre la patogenicidad de Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 2 en plántulas de melón Amarillo Canario

29 MÉTODO n Incremento del inóculo n Siembra de plántulas n Tratamiento térmico con microondas n Inoculación de las plántulas n Evaluación de síntomas

30 CONDICIONES DE LA CÁMARA DE AMBIENTE CONTROLADO -Temperatura: 27ºC 3ºC -Humedad relativa: 75 20% -Régimen luminoso:16 horas/día (cantidad de luz expulsada:450 mol E m -2 s -1 )

31 Figura 2: Plántulas de melón Amarillo Canario en la Cámara de ambiente controlado.

32 4 ESCALA DE SEVERIDAD

33 RESULTADOS PARTE EXPERIMENTAL II

34 SEVERIDAD DE LA FUSARIOSIS VASCULAR EN PLÁNTULAS DE MELÓN AMARILLO CANARIO INOCULADAS CON CONIDIAS DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis A LOS 17 DIAS DEL TRATAMIENTO

35 Nº DE PLÁNTULAS CON SÍNTOMAS DESPUÉS DE HABER SIDO INOCULADAS CON Fusarium oxysporum f. sp. melonis EN SUSPENSIÓN ACUOSA TRATADO A BAJA POTENCIA DURANTE 0´,1´,3´,6´,9´Y 12

36 Nº DE PLÁNTULAS CON SÍNTOMAS DESPUÉS DE HABER SIDO INOCULADAS CON Fusarium oxysporum f. sp. melonis EN SUSPENSIÓN ACUOSA TRATADO A MEDIA POTENCIA DURANTE 0´,1´,3´,6´,9´Y 12

37 Nº DE PLÁNTULAS CON SÍNTOMAS DESPUÉS DE HABER SIDO INOCULADAS CON Fusarium oxysporum f. sp. melonis EN SUSPENSIÓN ACUOSA TRATADO A ALTA POTENCIA DURANTE 0´,1´,3´,6´,9´Y 12

38 GRADO DE ATAQUE DE LA ENFERMEDAD ENFERMEDAD

39 Fórmula de Townsend y Heuberger

40 PORCENTAJE DE GRADO DE ATAQUE DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 EN PLÁNTULAS DE MELÓN

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42 CONCLUSIONES PARTE EXPERIMENTAL II

43 CONCLUSIONES PARTE EXPERIMENTAL II 1.- El tratamiento térmico con microondas reduce la viabilidad del inóculo de Fusarium oxysporum f. sp. melonis Raza 2, consiguiéndose una mayor reducción de la incidencia de la severidad de la enfermedad en aquellos tratamientos en los que la potencia y el tiempo de exposición es más elevado.

44 CONCLUSIONES PARTE EXPERIMENTAL II 2.- Los tratamientos de 1 minuto y 3 minutos a baja potencia consiguen reducir la patogenicidad del hongo, siendo esta reducción mayor en el tratamiento a 3 minutos baja potencia. 3.- En todos los tratamientos a media y alta potencia el grado de ataque es del 0%, con lo que el hongo pierde totalmente su patogenicidad.

45 PARTE EXPERIMENTAL III

46 Estudio de la influencia del tratamiento térmico con microondas sobre la viabilidad de F. oxysporum f. sp. melonis raza 2 en diferentes substratos: Estudio de la influencia del tratamiento térmico con microondas sobre la viabilidad de F. oxysporum f. sp. melonis raza 2 en diferentes substratos: PARTE EXPERIMENTAL III

47 n S1= Turba rubia:arena (1:1), mojada n S2= Turba rubia:arena (1:1), en seco n S3= Turba rubia, mojada n S4= Turba rubia, en seco n S5= Turba rubia: turba negra: perlita: vermiculita (61:24:7,5:7,5), mojada n S6= Turba rubia: turba negra: perlita: vermiculita (61:24:7,5:7,5), en seco

48 MÉTODO n Incremento del inóculo n Infestación del substrato n Tratamiento con microondas del substrato infestado n Viabilidad del inóculo

49 Método: Infestación del substrato n El substrato es esterilizado en autoclave durante 2 días seguidos aplicando cada día 121ºC, 1kg/cm 2 de presión, durante 60 minutos. n Se introduce el substrato en minibandejas de 6 alvéolos de poliestireno expandido. n Se procede a la infestación del substrato. n En cada bandeja tratada se dejan 2 alvéolos sin inocular, que sirvieron como testigo sin inóculo, tratándolo de la misma manera que los alvéolos infestados. n Además del testigo sin inóculo se infestó una bandeja con substrato con la misma cantidad de suspensión, dejándolo sin tratar con microondas, para así poder determinar la eficacia del tratamiento, mediante comparación con la cantidad de inóculo superviviente en cada una de las pruebas.

50 Substrato 1 n Tipo substrato: Turba rubia:arena (1:1 en v), mojada n Cantidad de inóculo/alvéolo: 5·10 6 conidias/alvéolo n Peso substrato seco/alvéolo: 34gr n Concentración de la suspensión: 5·10 5 conidias/ml n Cantidad de suspensión ajustada/alvéolo: 10ml n Agua destilada esterilizada/alvéolo: 1,22ml n Peso substrato mojado/alvéolo: 45,22 gr n Humedad: 33%

51 Substrato 2 n Tipo substrato: Turba rubia:arena (1:1 en v), seca n Cantidad de inóculo/alvéolo: 5·10 6 conidias/alvéolo n Peso substrato seco/alvéolo: 34gr n Concentración de la suspensión:10 6 conidias/ml n Cantidad de suspensión ajustada/alvéolo: 5ml n Peso substrato después de la inoculación con la suspensión: 39 gr/alvéolo n Humedad después de la inoculación: 15%

52 Substrato 3 n Tipo substrato: Turba rubia, mojado n Cantidad de inóculo/alvéolo: 5·10 6 conidias/alvéolo n Peso substrato seco/alvéolo: 12,5gr n Concentración de la suspensión: 1,21 ·10 6 conidias/ml n Cantidad de suspensión ajustada/alvéolo: 4,125ml n Peso substrato mojado: 16,62 gr/alvéolo n Humedad: 33%

53 Substrato 4 n Tipo substrato: Turba rubia, seca n Cantidad de inóculo/alvéolo: 5·10 6 conidias/alvéolo n Peso substrato seco/alvéolo: 12,5 gr n Concentración de la suspensión: 5·10 5 conidias/ml n Cantidad de suspensión ajustada/alvéolo: 1,83 ml n Peso substrato mojado: 14,33 gr/alvéolo n Humedad: 15%

54 Substrato 5 n Tipo substrato: Turba rubia:turba negra:perlita: vermiculita (64:24:7,5:7,5 en v) n Peso substrato mojado con agua destilada esterilizada hasta alcanzar una humedad del 33%: 24gr/alvéolo n Concentración de la suspensión: 5·10 5 conidias/ml n Cantidad de suspensión ajustada/alvéolo: 10ml n Humedad del substrato después de la inoculación: 74%

55 Substrato 6 n Tipo substrato: Turba rubia:turba negra:perlita: vermiculita (64:24:7,5:7,5 en v) n Peso substrato seco:14 gr/alvéolo n Concentración de la suspensión: 5·10 5 conidias/ml n Cantidad de suspensión ajustada/alvéolo: 10ml n Humedad del substrato después de la inoculación: 41%

56 Figura 4: Tratamiento con microondas de las minibandejas de alvéolos

57 RESULTADOS

58 RESULTADOS SUBSTRATO 1

59 EFICACIA DE LOS DISTINTOS TRATAMIENTOS CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 EN TURBA RUBIA:ARENA (1:1 EN V) MOJADA

60 EFICACIA DE LOS DISTINTOS TRATAMIENTOS CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis Raza 2 SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis Raza 2 EN TURBA RUBIA:ARENA (1:1 EN V) MOJADA

61 VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 SOMETIDO A TRATAMIENTO CON MICROONDAS EN TURBA RUBIA:ARENA (1:1 EN V) SECA RESUMEN DEL ANÁLISIS ESTADÍSTICO

62 RESULTADOS SUBSTRATO 2

63 EFICACIA DE LOS DISTINTOS TRATAMIENTOS CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 EN TURBA RUBIA:ARENA (1:1 EN V) SECA

64 EFICACIA DE LOS DISTINTOS TRATAMIENTOS CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 EN TURBA RUBIA:ARENA (1:1 EN V) SECA

65 VIABILIDAD DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 EN SUSPENSIÓN ACUOSA ( CONIDIAS/ML) SOMETIDO A DISTINTOS TRATAMIENTOS CON MICROONDAS RESUMEN DEL ANÁLISIS ESTADÍSTICO

66 COMPARACIÓN DE LA EFICACIA DEL TRATAMIENTO A BAJA POTENCIA (100W) CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 TURBA RUBIA : ARENA (1:1 EN V) SECA Y MOJADA

67 COMPARACIÓN DE LA EFICACIA DEL TRATAMIENTO A MEDIA POTENCIA (500W) CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 TURBA RUBIA : ARENA (1:1 EN V) SECA Y MOJADA

68 COMPARACIÓN DE LA EFICACIA DEL TRATAMIENTO A ALTA POTENCIA (1000W) CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 TURBA RUBIA : ARENA (1:1 EN V) SECA Y MOJADA

69 RESULTADOS SUBSTRATO 3

70 EFICACIA DE LOS DISTINTOS TRATAMIENTOS CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 EN TURBA RUBIA MOJADA

71 EFICACIA DE LOS DISTINTOS TRATAMIENTOS CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis Raza 2 EN TURBA RUBIA MOJADA

72 VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 SOMETIDO A TRATAMIENTO CON MICROONDAS EN TURBA RUBIA MOJADA RESUMEN DEL ANÁLISIS ESTADÍSTICO

73 RESULTADOS SUBSTRATO 4

74 EFICACIA DE LOS DISTINTOS TRATAMIENTOS CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 EN TURBA RUBIA SECA

75 EFICACIA DE LOS DISTINTOS TRATAMIENTOS CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 EN TURBA RUBIA SECA

76 VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 SOMETIDO A TRATAMIENTO CON MICROONDAS EN TURBA RUBIA SECA RESUMEN DEL ANÁLISIS ESTADÍSTICO

77 COMPARACIÓN DE LA EFICACIA DEL TRATAMIENTO A BAJA POTENCIA (100W) CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 TURBA RUBIA SECA Y MOJADA

78 COMPARACIÓN DE LA EFICACIA DEL TRATAMIENTO A MEDIA POTENCIA (500W) CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 TURBA RUBIA SECA Y MOJADA

79 COMPARACIÓN DE LA EFICACIA DEL TRATAMIENTO A ALTA POTENCIA (1000W) CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 TURBA RUBIA SECA Y MOJADA

80 RESULTADOS SUBSTRATO 5

81 EFICACIA DE LOS DISTINTOS TRATAMIENTOS CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 TURBA RUBIA:TURBA NEGRA: PERLITA:VERMICULITA (61:24:7,5:7,5 EN V), MOJADA

82 EFICACIA DE LOS DISTINTOS TRATAMIENTOS CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 SUBSTRATO COMPUESTO POR TURBA RUBIA:TURBA NEGRA: PERLITA:VERMICULITA (61:24:7,5:7,5 EN V), MOJADA

83 VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 SOMETIDO A TRATAMIENTO CON MICROONDAS SUBSTRATO COMPUESTO POR TURBA RUBIA:TURBA NEGRA: PERLITA:VERMICULITA (61:24:7,5:7,5 EN V), MOJADA RESUMEN DEL ANÁLISIS ESTADÍSTICO

84 RESULTADOS SUBSTRATO 6

85 EFICACIA DE LOS DISTINTOS TRATAMIENTOS CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 SUBSTRATO COMPUESTO POR TURBA RUBIA:TURBA NEGRA: PERLITA:VERMICULITA (61:24:7,5:7,5 EN V) SECO

86 SUBSTRATO COMPUESTO POR TURBA RUBIA:TURBA NEGRA: PERLITA:VERMICULITA (61:24:7,5:7,5 EN V) SECO EFICACIA DE LOS DISTINTOS TRATAMIENTOS CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis Raza 2

87 VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 SOMETIDO A TRATAMIENTO CON MICROONDAS SUBSTRATO COMPUESTO POR TURBA RUBIA:TURBA NEGRA: PERLITA:VERMICULITA (61:24:7,5:7,5 EN V) SECO RESUMEN DEL ANÁLISIS ESTADÍSTICO

88 COMPARACIÓN DE LA EFICACIA DEL TRATAMIENTO A BAJA POTENCIA (100W) CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 SUBSTRATO COMPUESTO POR TURBA RUBIA:TURBA NEGRA: PERLITA:VERMICULITA (61:24:7,5:7,5 EN V) SECO Y MOJADO

89 COMPARACIÓN DE LA EFICACIA DEL TRATAMIENTO A MEDIA POTENCIA (500W) CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 SUBSTRATO COMPUESTO POR TURBA RUBIA:TURBA NEGRA: PERLITA:VERMICULITA (61:24:7,5:7,5 EN V) SECO Y MOJADO

90 COMPARACIÓN DE LA EFICACIA DEL TRATAMIENTO A ALTA POTENCIA (1000W) CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DEL INÓCULO DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 SUBSTRATO COMPUESTO POR TURBA RUBIA:TURBA NEGRA: PERLITA:VERMICULITA (61:24:7,5:7,5 EN V) SECO Y MOJADO

91 CONCLUSIONES PARTE EXPERIMENTAL III

92 CONCLUSIONES PARTE EXPERIMENTAL III n 1.- El tratamiento térmico con microondas en turba rubia:arena (1:1 en v) mojada reduce la viabilidad del inóculo en todos los tratamientos, incluso en las bajas potencias, considerándose esta reducción significativa a partir de 3 minutos baja potencia. La erradicación del inóculo se consigue en 12 minutos baja potencia, y en 1 minuto, 3 minutos, 6 minutos, 9 minutos, y 12 minutos tanto en media como en alta potencia. n 2.- El tratamiento térmico con microondas en turba rubia:arena (1:1 en v) reduce la viabilidad del inóculo en todos los tratamientos, excepto en el tratamiento de 1 minuto baja potencia. La erradicación del inóculo se consigue en todas las altas potencias y a partir de 3 minutos en todas las medias potencias. No existen diferencias significativas entre la eficacia del tratamiento a 3 minutos baja potencia y a 6 minutos baja potencia, tampoco existen diferencias entre la eficacia del tratamiento a 1 minuto media potencia y 12 minutos baja potencia.

93 CONCLUSIONES PARTE EXPERIMENTAL III n 3.- Si comparamos la eficacia del tratamiento térmico con microondas en turba rubia:arena (1:1 en v) mojada y seca, se puede observar que el tratamiento es mucho más eficaz cuando el substrato posee un mayor grado de humedad, ya que en substrato mojado se consigue reducir la viabilidad del inóculo incluso en 1 minuto baja potencia. n 4.- El tratamiento térmico con microondas en turba rubia mojada reduce la viabilidad del inóculo en todos los tratamientos, incluso en las bajas potencias, considerándose esta reducción significativa incluso en 1 minuto baja potencia. La erradicación del inóculo se consigue en todas las altas potencias y medias potencias.

94 CONCLUSIONES PARTE EXPERIMENTAL III n 5.- El tratamiento térmico con microondas en turba rubia seca reduce la viabilidad del inóculo en todos los tratamientos, excepto en 1 minuto baja potencia. En el tratamiento de 3 minutos a baja potencia se consigue reducir la viabilidad de inóculo, aunque esta reducción no es significativa. En los tratamientos de 1 minuto baja potencia y 3 minutos baja potencia no existen diferencias significativas. El tratamiento de 12 minutos baja potencia tampoco difiere significativamente del tratamiento de 9 minutos baja potencia. La erradicación del inóculo se consigue en todas las altas potencias y a partir de 3 minutos en todas las medias potencias. n 6.- Si comparamos la eficacia del tratamiento térmico con microondas en turba rubia mojada y seca, se puede observar que el tratamiento es mucho más eficaz cuando el substrato posee un mayor grado de humedad, ya que en substrato mojado se consigue reducir la viabilidad del inóculo incluso en 1 minuto baja potencia.

95 CONCLUSIONES PARTE EXPERIMENTAL III n 7.- El tratamiento térmico con microondas en turba rubia:turba negra:perlita: vermiculita (61:24:7,5:7,5 en v) mojada (humedad 71%) reduce la viabilidad del inóculo en todos los tratamientos, incluso en las bajas potencias, considerándose esta reducción significativa incluso en 1 minuto baja potencia. La erradicación del inóculo se consigue en todas las altas potencias y a partir de 3 minutos, en todas las medias potencias. n 8.- El tratamiento térmico con microondas en turba rubia:turba negra:perlita: vermiculita (61:24:7,5:7,5 en v) seca (pero con un 41% de humedad que le proporciona la suspensión acuosa) reduce la viabilidad del inóculo en todos los tratamientos, excepto en el tratamiento de 1 minuto baja potencia, algo que no es muy lógico teniendo en cuenta el grado de humedad que presenta el substrato. La erradicación del inóculo se consigue en todas las altas potencias y a partir de 3 minutos en todas las medias potencias. No existen diferencias significativas entre la eficacia del tratamiento a 9 minutos baja potencia y a 12 minutos baja potencia, tampoco existen diferencias entre la eficacia del tratamiento a 1 minuto media potencia y 12 minutos baja potencia.

96 CONCLUSIONES PARTE EXPERIMENTAL III n 9.- Si comparamos la efectividad del tratamiento térmico sobre los dos anteriores substratos en 6 minutos y 9 minutos baja potencia se puede ver que la eficacia conseguida en el substrato con menor humedad (41%) es mayor que en el de mayor humedad (71%). Además en 1 minuto baja potencia se consigue mayor eficacia en el substrato con una humedad del 41%. Por todo ello se estudiará en posteriores trabajos la eficacia del tratamiento con microondas en turba rubia:turba negra:perlita: vermiculita (61:24:7,5:7,5 en v).

97 PARTE EXPERIMENTAL IV

98 n Se trató durante los mismos tiempos y potencias que en las pruebas anteriores, substrato utilizado en viveros comerciales conteniendo clamidosporas de F. oxysporum f. sp. melonis raza 2 y se estudió la efectividad del tratamiento térmico sobre la viabilidad de las mismas.

99 n Producción de inóculo n Tratamiento térmico con microondas –Tiempo:1, 3, 6, 9 y 12 minutos –Potencia: baja (100w),media (500w) y alta potencia (1000w) n Viabilidad del inóculo –Método de las 10 diluciones MÉTODO

100 Método: Producción de inóculo n Se repicó F.o. f. sp. melonis raza 2 en placas con PDA y se mantuvo en estufa a 27ºC durante 5 días n Se transfieren discos de micelio a un Erlenmeyer con 100 ml de medio líquido, previamente esterilizado en autoclave durante 20 minutos, y compuesto por: –100ml agua destilada –0,5 gr. extracto de levadura –0,5 gr. peptona –2 gr. glucosa n Filtrado y ajuste de la suspensión a una concentración de: 0,86·10 6 conidias/ml.

101 Método: Producción de inóculo n Se inoculan matraces con 100 gr.. de substrato compuesto por turba rubia:turba negra: perlita: vermiculita (61:24:7,5:7,5 en v) n Cantidad de suspensión ajustada/matraz: 75ml n Se mantienen en estufa a 27 ºC durante 60 días, tiempo en el que el hongo coloniza todo el substrato y forma clamidosporas n Pasados los 60 días se comprueba la presencia de clamidosporas mediante microscopio óptico.

102 Figura 5: Clamidosporas de Fusarium oxysporum f. sp. melonis Raza 2

103 RESULTADOS PARTE EXPERIMENTAL IV

104 EFICACIA DE LOS DISTINTOS TRATAMIENTOS CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DE LAS CLAMIDOSPORAS DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2

105 EFICACIA DE LOS DISTINTOS TRATAMIENTOS CON MICROONDAS SOBRE LA VIABILIDAD DE CLAMIDOSPORAS DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2

106 VIABILIDAD DE LAS CLAMIDOSPORAS DE Fusarium oxysporum f. sp. melonis RAZA 2 SOMETIDAS A DIFERENTES TRATAMIENTOS CON MICROONDAS RESUMEN DEL ANÁLISIS ESTADÍSTICO

107 CONCLUSIONES PARTE EXPERIMENTAL IV

108 CONCLUSIONES PARTE EXPERIMENTAL IV 1.- El tratamiento térmico con microondas reduce la viabilidad de las clamidosporas de Fusarium oxysporum f. sp. melonis Raza 2. Cuanto mayor es la potencia y tiempo de exposición se consigue una reducción de la viabilidad mayor. A partir de 3 minutos baja potencia se consigue reducir la viabilidad de las clamidosporas de manera significativa en todas las bajas potencias.

109 2.- Con todas las altas potencias se consigue la erradicación del hongo en todos los tratamientos y a partir de 3 minutos media potencia se consigue una eficacia del 100% en todas las medias potencias de todos los tratamientos. CONCLUSIONES PARTE EXPERIMENTAL IV

110 3.- En los resultados obtenidos con los tratamientos de 3 minutos baja potencia y 6 minutos baja potencia no existen diferencias significativas. Los tratamientos de 9 y 12 minutos baja potencia no difieren significativamente del tratamiento de 1 minuto media potencia. CONCLUSIONES PARTE EXPERIMENTAL IV

111 CONCLUSIONES GENERALES

112 1.- De los ensayos realizados en los que mayor eficacia se ha conseguido es en el tratamiento de suspensiones acuosas donde incluso en las bajas potencias y reducidos tiempos de exposición se consigue resultados muy positivos. De la comparación de la Parte experimental I con la Parte experimental III y IV, se puede deducir que en la Parte experimental I (tratamiento de suspensiones acuosas) en el tratamiento de 1 minuto y 3 minutos a baja potencia se produce ya una reducción significativa de la viabilidad del inóculo del hongo, mientras que en las Partes experimentales III y IV, se consigue reducir de manera significativa la viabilidad del inóculo a partir de 3 minutos baja potencia.

113 n 2.- En la Parte experimental II se observa cómo los tratamientos a media y baja potencia consiguen que el hongo pierda totalmente su patogenicidad n 2.- En la Parte experimental II se observa cómo los tratamientos a media y baja potencia consiguen que el hongo pierda totalmente su patogenicidad. n 3.- En la Parte experimental III se puede observar cómo el grado de humedad que presenta el substrato va a influir de manera significativa en la eficacia obtenida en cada tratamiento, cuanto mayor es el grado de humedad mayor es la reducción de la viabilidad del inóculo. Por tanto es conveniente humedecer el substrato antes de realizar los tratamientos. CONCLUSIONES GENERALES

114 n 4.- Los tratamientos de 1, 3, 6 y 9 minutos a baja potencia consiguen reducir la viabilidad de Fusarium osysporum f. sp. melonis raza 2, incluso de las clamidosporas (estructuras somáticas de supervivencia), siendo esta reducción significativa a partir de 3 minutos baja potencia. n 5.- Los tratamientos de 1 minuto alta potencia (1000w), 3, 6, 9 minutos media (500w) y alta potencia, y 12 minutos baja, media y alta potencia consiguen reducir la viabilidad del inóculo, incluso de las clamidosporas con una eficacia del 100%. CONCLUSIONES GENERALES

115 MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCIÓN

116


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