¿Qué recordamos de todo esto?

Presentación del tema: "¿Qué recordamos de todo esto?"— Transcripción de la presentación:

1 ¿Qué recordamos de todo esto?

2 Técnicas básicas clásicas
Enzimas de restricción y otras enzimas. Clonación de un fragmento de DNA (plásmidos, fagos, cósmidos y YAC´s). PCR Southern-blot e hibridación con sondas. Secuenciación.

3 Técnicas básicas clásicas
¿Enzimas?

4 Enzimas de restricción
Nucleasa sintetizada por las bacterias como un mecanismo de defensa natural. Capaz de reconocer y cortar una secuencia específica de nucleótidos doble cadena. Longuitud de secuencia de reconocimiento ente 4 y 8 bp (excepto las meganucleasas) Primera enzima descubierta fue a partir de Haemophilus influenzae

5 Extremos cohexivos

6 Extremos romos

7 Técnicas básicas clásicas
¿Enzimas? Clonación de DNA

8 Vectores de clonación Replicación autónoma Mapa de restricción conocido: un único punto de corto en el sitio de clonación. Marcadores selectivos: Resistencia antibióticos. Cambios de color. Recuperación sencilla. Tipos de menor a mayor tamaño: Plásmido, fagos, cósmidos, BACs, etc.

9 De acuerdo, pero ¿Qué es una genoteca?

10 Técnicas básicas clásicas
Inserción del fragmento de DNA a clonar en el vector de clonación

11 Técnicas básicas clásicas

12 Técnicas básicas clásicas
¿Enzimas? Clonación de DNA ¿PCR?

13 Técnicas básicas clásicas
¿Enzimas? Clonación de DNA ¿PCR? Vamos a verlo con un video!!!!!!!.

14 Técnicas básicas clásicas
¿Enzimas? Clonación de DNA ¿PCR? Métodos de detección con sondas

15 Técnica de Southern blot
3º PASO 1º PASO 2º PASO 4º PASO 5º PASO

16 Técnicas básicas clásicas
¿Enzimas? Clonación de DNA ¿PCR? ¿Secuenciación? Métodos de detección con sondas

17 Método de Sanger y método automático
¿Y si vemos una peli? Método de Sanger y método automático

18 ¿Y respecto a la manipulación del genoma?